Menetelmät mittaaminen NADPH-MAO

entsyymi NADPH-oksidaasi on tunnistettu tuottaja reaktiivisia happiradikaaleja aikana prosesseja, mukaan lukien kasvua sileän lihaksen soluissa. Nämä reaktiiviset lajit liittyy erilaisia ​​sairauksia, mukaan lukien kohonnut verenpaine, diabetes, syöpä ja tulehdus, menetelmiä, joilla valvotaan tämän entsyymin aktiivisuutta on kriittinen mahdollisen hoidon kehityksen. NADPH MAO

NADPH oksidaasin kuuluu entsyymien perhe, joka auttaa elektronin kuljetus NADPH ja happea. Kuitenkin, NADPH-oksidaasi on ainutlaatuinen kyky tuottaa reaktiivisia happiradikaaleja Tämän reaktion, verrattuna muihin perheenjäsenet, jos reaktiivisia happiradikaaleja tuotetaan muuta kautta. Multimeeriset proteiini-kompleksin, NADPH-oksidaasin koostuu kalvoon sitoutunut flavocytochrome b558, jota käytetään mittauksen merkki.
Reaktiivisia happiradikaaleja (ROS) Generation

päälähde ROS, erityisesti vetyperoksidia, NADPH MAO tuottaa Pieni, mutta määriä kautta isoformista ilmaistu verisuonia, jotka ovat mukana signalointiprosessinsa. Tämä tasalaatuisen tuotannon voi lopulta hukuttaa luonnollinen antioksidantti-järjestelmän, joka aiheuttaa menetyksiä suojaava yhdisteitä, kuten typpioksidin ja sukupolven vieläkin tehokkaampi ROS.
Chemiluminescence Menetelmä

Chemiluminescence mahdollistaa erittäin herkkä, automatisoitu mittaus NADPH sidaasiaktiivisuuden yli useissa pitoisuuksissa. Tänä menetelmä, NADPH lisätään substraatti kudoksen näyte, joka sisälsi NADPH-oksidaasi. Reaktion, ROS syntyy ja reagoi yhdisteen lusigeniiniä tuottaa chemilluminescent vaikutus, joka on mitattu. Luminesenssi on suoraan verrannollinen NADPH-oksidaasiaktiivisuus, kuten entsyymin määrää reaktion nopeutta.
Kinetic Pitoisuus kautta virtaussytometria

Tässä menetelmässä kudos näytteet analysoidaan kautta virtaussytometriaa. Luuytimen erotetaan näytteestä käyttäen Hanks 'Balanced Salt Solution. Erityiset tahrat ja vasta-aineiden havaitsemiseksi lisätään näytteeseen polystyreeni putkiin. Näytettä inkuboidaan sitten, pestiin Hanks 'Balanced Salt Solution, jotka on merkitty molekyyli-antureista ja valmistettiin virtaussytometrialla. Kontrolliputket tehdään myös vertailua ja kalibroida virtaussytometri. Sitten kone juoksi ja joiden tulokset.