PCR Perustiedot

Polymeraasiketjureaktiolaitteisto (PCR) on menetelmä DNA. Menetelmä on nimetty DNA polymeraasi, entsyymiä käytetään edistämään prosessia DNA. Kary Mullis kehittänyt tekniikan vuonna 1984 ja sai Nobelin kemian työstään vuonna 1993. Sovellukset PCR

yhteinen sovelluksia PCR ovat DNA-sormenjälkien (jossa DNA-fragmentit eristettiin ja verrataan olemassa olevaa tietoa), analyysi äärimmäisen pieni näyte määriä (jonka avulla tutkijat voivat rekonstruoida sukupuuttoon organismien ja kuolleen historialliset luvut) ja taudin diagnosointiin (myös viruksen DNA ja syövän tutkimus).
PCR Components

Tarvittavat komponentit ja reagenssit PCR-reaktion ovat: perimän DNA (malli jäljitellä), kaksi aluketta (yhden eteenpäin ja yhden taaksepäin) sisältyy DNA-malli järjestyksessä; reaktio cocktail (mukaan lukien Taq-polymeraasia ja puskuria ratkaisu, joka tarjoaa elinkelpoisen ympäristön, jossa reaktio tapahtuu) ja substraatti Taq-entsyymin (nukleotidin, joka auttaa "rakentaa" yksittäisten osa).
askelta PCR

vaiheet reaktion ovat: naturointi (jonka aikana lämpötila on nostetaan erottaa DNA templaattijuosteet) hehkutus pohjamaali (jonka aikana lämpötila jäähdytetään kannustaa vapaasti kelluva alukesekvenssejä kiinni eristetty DNA templaattijuosteet) ja laajennus (jonka aikana Taq polymeraasi kiinnittyy pohjamaali ja käyttää vapaa kelluva nukleotidin jäljitellä kunkin eristetty DNA templaattisäi). Toistamalla useita kertoja eristää jokainen toistaa järjestyksessä sen alkuperäisestä DNA malli. Jokainen toistoa kasvaa eksponentiaalisesti määrä monistaa DNA kunnes on riittävä määrä haluamaasi kokeilua. Optimaalinen lämpötila ja muut olosuhteet, katso Yalen yliopiston "Designing PCR ohjelmat" Resources, alla.
Vaiheet PCR

reaktio voidaan kuvata myös kolmessa vaiheessa : Vahvistus (jonka aikana DNA: ta eksponentiaalisesti kopioidaan), taso-Off (jonka aikana Taq-polymeraasin menettää aktiivisuutta), ja Plateau (jolloin ei enää voidaan tuottaa nykyisen reaktio). Saat interaktiivisen esityksen PCR-reaktion, katso Utahin yliopistossa "PCR Virtual Lab" Resources, alla.