Kuinka valmistautua agarmaljoille

molekyylibiologian ja bakteriologian käyttää agarmaljoille kulttuurin mikro-organismien kuten bakteerien kokeiluihin. Agar on aine, joka jähmettyy, tai geelejä, nestemäistä ravintoalustaa vaaditaan mikro-organismin hengissä ja kasvaa. Kun siirrettiin agar-levy, bakteerit kasvavat erillisiksi pesäkkeitä (jos ne on kasvatettu pieninä pitoisuuksina) tai tahroja (jos ne on kasvatettu suurina pitoisuuksina), ja voidaan ottaa talteen analyysiä varten. Biologit valmistella agarmaljoille, sillä prosessi vaatii pääsyä laboratorio-reagensseja ja koneiden ja hyvä käsitys molekyylibiologian ja steriiliin. Asiat Tarvitset
Käsineet
Laboratoriotakki
Naamariin
bunsenpoltin
laminaarivirtausvetokaapissa
Steriilit petrimaljat
10g bacto-tryptonia
5g hiivauute
15g agaroosin
1 ml 1 N NaOH
steriiliä tislattua vettä
Lasipullo
autoklaavinauhalla
Autoklaavit
lisäravinteet, esim. antibiootit kuten ampisilliinitrihydraatti
Näytä lisää Ohjeet
1

Laita kunnollisia suojavarusteita, kuten käsineitä, laboratoriotakkia ja naamariin ja puhdistamaan kaikki pinnat. Työskentelevät vieressä bunsenpoltin tai edullisesti, kun steriili laminaarivirtauskaapissa. Tämä estää ilman epäpuhtauksille joutumasta agar.
2

Poista pino petri ruokia niiden pakkauksiin, mutta säästää pakkaamisesta agarmaljoille. Merkitse ulkopintaan lautasen (ei kantta) ja tyyppi agar ja valmistuspäivämäärä. Asettele levyt ulos yksikerroksinen kanssa kannet poistetaan tehdä kaataminen agar helpompaa.
3

Sekoita bacto-tryptonia hiivauute ja agaroosin yhteen ja sitten lisätään natriumhydroksidi (NaOH). Lisää steriiliä tislattua vettä saada 1L ravintoväliaineista. Siirretään tämä liuos lasipullo, jossa ainakin 1.5L tilavuus. Löyhästi ruuvaa kansi pullo ja etiketti valmistuspäivämäärä ja nimi media. Aseta kaistale autoklaavinauhalla pullossa ja autoklaavia se 25 minuuttia. Anna pullon jäähtyä ole pienempi kuin 45 astetta (tai se kovettuu ennenaikaisesti), mutta ei yli 50 astetta. Voit tallentaa pulloa jäähdytetään ja jähmettynyt agar 4 astetta ja lämpimänä nesteytetty. Mahdollisesti tarvittavan erityistä koetta tai bakteeria, lisää asianmukainen määrä ja tyyppi täydentää kuten antibiootteja. Jos materiaali on liian kuuma, täydentää tuhotaan, niin huolellisesti tarkistaa lämpötila media ennen kuin jatkat.
4

Kaada riittävä määrä agar puoli täytetään astia kun agar on vielä lämmin ja nesteytetyn. Varmista, että pinta-ala on kokonaan peitetty. Älä kaada liikaa tai anna agar huipulle lautasen. Pidä levyt steriilin tilan sallimalla bunsenpoltin tai laminaarivirtausvetokaapissa juosta jatkuvasti. Levyjen annetaan asettaa ja vaihda kannet.
5

Kuivaa agarmaljoille noin 30 minuuttia tunnin uunissa ei ole korkeampi kuin 37 astetta. Vaihtoehtoisesti voit jättää ne laminaarivirtausvetokaapissa kolme minuuttia tai puhdistettava laboratoriopöydälle vähän liikennettä alueella, joka ei ole vetoinen päivän tai kaksi. Kuivaus levyt pysähtyy tahansa bakteeri ratkaisu saattaa agarpinnalle alkaen yksinkertaisesti laimentamalla ulos ja työntämällä pois, eikä pesäkkeitä muodostavat kiinnitettäviä agar.
6

varastoitava huolellisesti levyt pimeässä ja 4 astetta. Pino kuivattuja agarmaljoilta niiden pohjat jopa voit selvästi nähdä tarrat ja ehkäistä mikro-organismien ja roskia putoamasta agarpinnalle ja saastuttavat ne. Laita astiat takaisin niiden pakkauksiin, peitä alumiinifoliolla ja teippi pakkaus kiinni. Merkitse pakattu levyt niiden sisältöä ja valmistuspäivämäärä. Voit tallentaa levyjä jopa kaksi kuukautta ja pitäisi hävitä ne sen jälkeen.