Ero suora ja epäsuora ELISA

entsyymi-immunologinen määritys (ELISA) käsittää reaktio vasta-entsyymi kompleksin antigeeni tai vasta-aine pidetään liikkumattomina kiinteälle pinnalle. On inkuboitu konjugoitu entsyymi sopivan alustan, tuote on muodostettu. Muodostumista tuotteen auttaa havaitsemaan läsnäolo antigeenin tai vasta-aineen ja sen määrä antaa mitan määrää antigeeni-vasta-reaktio, joka on tapahtunut. ELISA-testi voidaan suorittaa kahdella tavalla: suoraan ja välillisesti. Testi Formaatti

suoraan ELISA-testi, ensisijainen vasta-aine pidetään seinille mikrotiitterilevyn. Kun näyte, jonka epäillään sisältävän antigeeni on lisätty, on antigeeni-vasta-aineen reaktiota. Seuraava, entsyymi-sekundaarista vasta-ainetta, joka kykenee reagoimaan antigeenin kanssa lisätään. Jos antigeeni on läsnä näytteessä, se sitoutuu tämän entsyymi-vasta-aine. Kun väritön substraatti lisätään, jos väri kehittyy, se osoittaa antigeenin läsnäolo. Epäsuoraan ELISA, antigeeni pidetään seinille mikrotiitterilevyn. Kun näyte, jonka epäillään sisältävän vasta-aineita lisätään, antigeeni-vasta-reaktio tapahtuu. Seuraava, entsyymi-sekundaarista vasta-ainetta, joka kykenee reagoimaan sitoutumattoman alueen vasta-aine on lisätty. Kun väritön substraatti on lisätty, se johtaa kehitystä väriä, jos käytetyn näytteen sisältää vasta-aineita.
Helppous Testaus

monenlaisia ​​leimattu sekundaarinen vasta-aineet ovat kaupallisesti saatavilla. Lisäksi on mahdollista luoda useita ensisijainen vasta tietyn lajin ja käyttää samaa sekundaarisen vasta-aineen toteamiseksi. Tämä tekee epäsuora ELISA helppo suorittaa. Kun suora ELISA, primaaristen vasta-aineiden on oltava erityisesti valmistettu reagoimaan antigeenin epäillään olevan näytteessä. Tämä tekee suoraa ELISA verrattuna epäedullinen epäsuora testi.
Nopeus Testaus

suorat ELISA-testi on nopea verrattuna välillisten testillä, koska se käytetään vain yhtä vasta-ainetta. Epäsuoralla ELISA vaatii ylimääräisen vaiheen inkubaation toisen vasta testin aikana, mikä aiheuttaa viiveen saada tuloksia.
Herkkyys

suora ELISA-testi on vähemmän herkkä kuin epäsuoraa testin, koska siellä on paljon vähemmän signaalin vahvistus. Lisäksi merkintöjä ensisijainen vasta-entsyymillä voi heikentää sen immonoreactivity profiilia. Kun kyseessä on epäsuora ELISA, ensisijainen vasta-aine ei ole merkitty, ja näin ollen se säilyttää immunoreaktiivisuus. Lisäksi kukin ensisijainen vasta-aineella on monia epitooppeja, jotka voivat sitoutua sekundaarinen vasta-aine, tämä mahdollistaa signaalin vahvistusta, mikä parantaa menetelmän herkkyyttä. Kuitenkin on olemassa mahdollisuus ristireaktiivisuuden välillä antigeenin ja sekundaarista vasta-ainetta, joka johtaa virheen tuloksia. Ei ole olemassa sellaista mahdollisuutta suoraan ELISA-menetelmällä.