Perfuusio Tekniikka

perfuusio tekniikka tarjoaa nopean ja yhdenmukaisen kiinnittäminen kaikkiin yksittäisten solujen läsnä kudosta. 4 prosenttia paraformaldehydissä fiksatiivi johdetaan kautta verenkiertoon saada kudosta kohteisiin. Tärkein tavoite sivusto Drug Administration erityisesti elin voidaan tunnistaa avulla tätä tekniikkaa. Perfuusio on myös auttanut tutkijoita ymmärtämään rakenteellisia ja toiminnallisia järjestämisestä ihmisen aivoissa. Asiat Tarvitset
Eläinten (rotta tai apina) finnish Perfuusiotaso pumppu, dekantterilasiin
Fixative (4 prosenttia paraformaldehydillä) finnish injektioneulat
Perfuusiotaso tippua asettaa
Sakset
Scalpel
Pinsetit
0,9 prosenttia suolaliuosta
Ice box
Näytä lisää Ohjeet
1

Valmistetaan uutta 4 prosenttia paraformaldehydissä sekoittamalla 40 g paraformaldehydiä 800 ml vettä. Liuos lämmitetään 60 ° C samalla sekoittaen. Jäähdytä liuos 4 C. Säädetään pH 9,5 avulla pH-mittarilla. PH: n säätämiseen, lisätään jääetikkaa, jolloin saatiin haluttu pH.
2

Aseta perfuusion pumppu, liittää kaikki lasi-osat ja perfuusio neula. Ajaa 100 ml vesijohtovettä läpi putkistossa perfuusion pumpun poistaa jäännös lasiosat. Aseta dekantterilasiin kiinnitteenä pakastin.
3

Avaa loppuun perfuusion putkeen ja aseta se kiinnitteessä dekantterilasiin. Scale liuoksen tilavuus mukaan eläimen koon mukaan. Nyt säätää perfuusion pumpun venttiili hitaasti ja tasaisesti tippua. Sulje venttiili. Täytä perfuusion laite on 0,9 prosenttia (paino /tilavuus) suolaliuosta.
4

Aseta kirurgian instrumentteja leikkauspöydän lähellä. Anna anestesian injektiona eläimen mukaan sen painon (ketamiinia 0,5 mg /kg). Aseta eläin Leikkauspöytä sen takaisin alas.
5

Leikkaa veitsellä, pituutta pitkin kalvon. Kun suuret sakset, tylppä alaspäin, leikkaa sidekudoksen alareunassa kalvon. Paljasta sydän. Pidä sykkivä sydän pinseteillä ja aseta neula vasempaan kammioon.
6

Avaa venttiili perfuusion pumpun jotta virtaus 0,9 prosenttia suolaliuosta. Varmista, että liuos virtaa vapaasti ja eläin on elossa. Sydän eläimen pitäisi olla jatkuvasti pelaajan. Kun veri korvataan suolaliuosta, muuttaa ratkaisu 4 prosenttia paraformaldehydillä.
7

Lopeta verenkierron ja leikellä kudoksen kiinnostava. Pidä kudosta samassa alustassa 4 C